FISH (флуоресцентная гибридизация in situ)
Определение
Лабораторная методика, используемая для выявления и определения местоположения определенной последовательности ДНК на хромосоме. Хромосомный набор человека фиксируется на предметном стекле; добавляется небольшой фрагмент ДНК (зонд), помеченный флуоресцентным красителем. Зонд находит и связывается с соответствующей ему последовательностью на хромосоме, а место связывания зонда становится видимым под специальным микроскопом.
Цель
Диагностика генетических заболеваний, картирование генов, выявление хромосомных аномалий и сравнение хромосом между видами. В клинике это целенаправленный тест, используемый при подозрении на конкретный синдром микроделеции или дупликации.
Результаты
В области связывания зонда наблюдается ожидаемое число сигналов. Отсутствие сигнала указывает на делецию, избыток на дупликацию, а появление сигнала на неожиданной хромосоме на перестройку или транслокацию.
Риски и ограничения
FISH находит только то, что ищет. Это целенаправленный тест: зонд показывает только ту область, для которой он разработан. Поэтому он не подходит для скрининга, если подозрение не направлено на конкретный синдром.
Хромосомный микроматричный анализ (CMA) представляет собой более широкий, высокоразрешающий тест первой линии, тогда как FISH это более узконаправленный подход. Согласно международному консенсусному заявлению, у лиц с задержкой развития/умственной отсталостью, расстройством аутистического спектра или множественными врожденными аномалиями диагностическая эффективность CMA составляет 15-20%, а G-бэндинг кариотипирования, около 3%.
В то же время истинно сбалансированные перестройки и низкоуровневый мозаицизм, как правило, не выявляются методами матричного анализа, в этих случаях кариотипирование и FISH сохраняют свою ценность. Консенсус рекомендует сохранить кариотипирование при явных хромосомных синдромах (например, синдроме Дауна), при семейном анамнезе перестроек и при анамнезе повторных выкидышей.